电融合法选育高温高产二羧酸酵母菌的研究

摘要

研究了热带假丝酵母1045的两个突变株HYU_m和SD_1的原生质体电融合及其在高温下高产二羧酸菌株的选育。利用灭活的高温产酸HYU_m原生质体和28℃产酸、高温丧失产酸功能的SD_1原生质体,在1.2MHz、800V/cm高频交变电场下,施加脉冲宽度为25μs,强度6～12kV/cm,脉冲个数3、5或10,间隔0.5s的电脉冲,获得48株融合子,表观融合率为(0.95～5.05)×10^(-4)。对融合子进行菌落形态、拮抗、酯酶同工酶、DNA含量实验。筛选出高温产DC_(12)为亲株HYU_m的1.43倍、SD_1的3.4倍的融合菌株2株。还提出了用超声处理测定细胞DNA含量的新方法。