小鼠胰岛提取方法改良的实验研究

摘要

目的 探讨小鼠胰岛提取方法 的改良及效果.方法根据胰岛提取方法不同,将小鼠随机分为胆总管穿刺组和胆总管穿刺联合胰腺原位注射组(联合注射组),每组各100只.胰岛提取的改良方法采用胆总管穿刺联合胰腺原位注射法灌注胰腺,体视显微镜下挑选并纯化胰岛.鉴定胰岛的形态和纯化情况,统计两组的胰岛产量及胰岛提取成功率.分析胰岛在体外培养1周内的存活情况,并评估体外培养24 h和4 d后胰岛的胰岛素分泌功能.结果 与胆总管穿刺组比较,联合注射组提取胰岛的产量显著增高(P0.05).胆总管穿刺联合胰腺原位注射法所提取的胰岛形态完好、纯度高、活性好.新鲜分离的胰岛体外培养24 h后胰岛存活率接近100％;体外培养1～5 d,胰岛细胞存活情况良好;体外培养6 d开始,胰岛出现中心性死亡.体外培养24 h和4 d后,给予高葡萄糖刺激胰岛后,小鼠胰岛功能均正常.结论 胆总管穿刺联合胰腺原位注射法可以提高胰岛的产量,且获取的胰岛细胞活性和功能良好.