siRNA降低MACC1基因表达对子宫内膜癌细胞增殖凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响研究

摘要

目的 探讨抑制结肠癌转移相关因子1(MACC1)基因表达对子宫内膜癌细胞增殖凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响.方法 人子宫内膜癌细胞株Ishikawa被分为空白对照组、阴性对照组和MACC1转染组(转染合成的MACC1-siRNA),转染48 h后,采用Western blot法检测各组细胞MACC1的蛋白表达;CCK8法检测转染24、48、72 h时细胞的增殖情况;流式细胞仪检测转染48 h细胞的凋亡情况;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase 3)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)的蛋白表达情况.结果 阴性对照组与空白对照组的MACC1蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);MACC1转染组的MACC1蛋白相对表达量低于空白对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05).转染24 h时3组细胞OD490值比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);转染48 h和72 h时,MACC1转染组细胞OD490值均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).MACC1转染组细胞凋亡率高于空白对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05).MACC1转染组PCNA、PI3K、p-AKT蛋白相对表达量均低于空白对照组,cleaved caspase 3蛋白相对表达量高于空白对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 抑制MACC1基因表达可降低子宫内膜癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,上调cleaved caspase 3蛋白表达,下调PCNA及PI3K/AKT信号通路蛋白的表达.