基因芯片技术在检测乙型肝炎病毒 P区YMDD变异中的研究

摘要

目的用基因芯片检测未经抗病毒治疗的HBV DNA阳性血清中HBV P区YMDD变异情况,从分子生物学角度了解YMDD两种变异的状态,为科学合理地指导临床抗病毒治疗及预测患者临床预后提供有力的依据.方法将150份未经抗毒治疗的HBV DNA阳性血清,用PCR方法扩增P区,扩增产物与基因芯片上的寡核苷酸进行杂交,杂交结果通过扫描仪扫描到计算机上,经软件分析可得到HBV YMDD野生型及其YVDD和/或YIDD变异型结果,并对部分阳性标本用基因序列测序证实.结果 150份HBV DNA阳性血清,用基因芯片方法检出阳性标本(包括YMDD野生型和变异型)共122例,占81.3%,阴性标本28例,占18.7%;在122例阳性标本中,单纯YMDD野生型(即无变异标本)有90例,占73.8%;YVDD变异28例,占22.9%; YIDD变异2例,占1.6%;YVDD和YIDD混合变异2例,占1.6%, 变异株检出率为26.2%,而且变异株均与野生株共存.其中8份阳性标本进行基因序列测序,证实与芯片检测结果完全一致.结论 (1)用当前先进的基因芯片技术检测HBV P区YMDD变异,操作简便,结果可靠,特异性高.(2)基因芯片可快速、同时、多人份检出HBV YMDD野生株及其YIDD和/或YVDD突变株的共同感染.(3)部分HBV感染者在未经抗病毒治疗情况下已自然存在HBV YMDD变异,而且变异株均与野生株共存,其中以YVDD变异为多.(4)HBV感染患者在治疗前后有必要检测是否存在HBV YMDD变异株感染,为指导临床科学合理用药和制定治疗方案提供依据.