人工合成的固有防御调节肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的影响

摘要

目的探讨不同浓度固有防御调节肽（IDR-1018）对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）成熟生物被膜的破坏作用以及对MRSA生物被膜形成的抑制作用。方法将MRSA以1×105 CFU/ml均匀接种于96孔板, 48 h后建成生物被膜模型。给予用胰酪胨大豆肉汤培养基（TSB）倍比稀释的不同浓度的IDR-1018溶液作为实验组, 使其加入细菌悬液后的浓度达到3.75～1 000 mg/L。红霉素倍比稀释制成不同浓度梯度的药液后, 与低浓度（15 mg/L）IDR-1018联合作为混合组。等量TSB作为空白对照组。24 h时结晶紫染色半定量法, 测吸光度（A）值, 检测生物被膜的生长情况。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行统计分析。结果与对照组（A595=1.764±0.026）相比较, IDR-1018对成熟的MRSA生物被膜发挥了较为显著的破坏作用, 且IDR-1018对生物被膜的影响存在一定的剂量依赖关系, 即随着药物浓度的不断降低, 其对生物被膜的破坏作用出现了一定幅度的下降。当浓度低至15 mg/L时, A595=0.946±0.047（t=32.955, P＆0.01）;浓度为7.5 mg/L时, A595=1.211±0.054（t=12.731, P＆0.05）;浓度为3.75 mg/L时, A595=1.360±0.066（t=4.843, P＆0.05）, 与对照组相比差异仍具有统计学意义。对于尚未成熟的生物被膜, 与对照组（A595=1.689±0.068）比较, 当浓度低至15 mg/L（A595=0.846±0.057, t=34.127, P＆0.01）时, IDR-1018对MRSA生物被膜的形成过程仍具有较为显著的抑制作用;而浓度降至7.5 mg/L（A595=1.402±0.181, t=5.240, P＆0.05）时, 对生物被膜的抑制作用出现了一定幅度的下降, 但与对照组比较差异仍具有统计学意义。浓度为3.75 mg/L（A595=1.631±0.190, t=0.913, P＆0.05）时, 这种抑制作用出现了较明显的下降。当低浓度（15 mg/L）的IDR-1018和不同浓度的红霉素联合使用时, 其对MRSA生物被膜的破坏与抑制作用明显高于单独使用红霉素, 亦优于单独使用IDR-1018时的效果。结论在MRSA生物被膜生成过程中, IDR-1018可以起到较好地抑制作用;对于已经成熟的MRSA生物被膜, IDR-1018可以起到较好地破坏作用。