羊口疮病毒及山羊痘病毒双重PCR检测方法的建立

摘要

为实现山羊两种疫病病原体——羊口疮病毒(ORFv)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于ORFV的025基因及GTPV的ITR基因,分别设计用于普通双重PCR的引物两对、用于双重实时荧光定量PCR的特异性引物及探针两套.试验结果显示,所建立的ORFV-025/GTPV-ITR-S双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达104拷贝/μL DNA;所建立的025-ITR二联探针实时荧光定量PCR方法亦可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达102.71拷贝/μL和102.88拷贝/μL DNA.本研究初步建立了可同步快速特异性检测ORFV和GTPV的双重普通PCR及二联实时荧光定量PCR检测方法.