琼脂扩散法定量测定多黏菌素对霉菌的抑菌活力

摘要

本文研究抗菌肽抑制霉菌的活力定量测定方法,选用多黏菌素B和产黄青霉作为研究对象,采用琼脂扩散法优化指示菌浓度、抗菌肽添加量、培养时间等影响活力定量测定的条件,进一步以黑曲霉为指示菌进行方法验证;通过建立抗菌肽浓度对数值与抑菌圈直径之间的线性方程进行抗菌肽抑菌活力的计算.研究结果显示,琼脂扩散法测定多黏菌素B抑制霉菌活力的最佳条件:90mm平板添加PDA培养基15 mL,指示菌孢子浓度(1～5) ×106个/mL,多黏菌素B添加量100μL,4℃预扩散时间6～10 h,28℃培养时间24 h.以黑曲霉为指示菌进行方法验证时发现方法重复性好、精密度高.在此条件下,多黏菌素B对产黄青霉和黑曲霉的抑菌活性分别为524.81 U/mg和605.76 U/mg.该研究为抗菌肽在试验和生产过程中的活力测定提供参考和依据.