脂肪酶GZEL及其C-端截断突变体对磷脂单分子膜的吸附动力学研究

摘要

基于单分子层技术研究了禾谷镰孢菌脂肪酶GZEL对不同磷脂单分子膜的吸附动力学.同时,采用截断突变方法分析C-端肽段(编号为269-319的氨基酸)缺失后对脂肪酶GZEL界面吸附动力学参数的影响.研究发现,脂肪酶GZEL对不同磷脂单分子层的吸附动力学参数(吸附常数ka,解离常数kd,吸附平衡常数KAds)与磷脂单分子膜的种类及初始表面压力密切相关.尽管如此,相比于野生型GZEL,269-319肽段缺失后导致酶蛋白对不同磷脂单分子膜的吸附常数ka均显著降低,而解离常数kd则显著升高,两者共同导致酶蛋白对于磷脂单分子膜的亲和力KAds显著降低.野生型GZEL对不同磷脂单分子膜的选择性顺序为磷脂酰丝氨酸＞磷脂酰胆碱＞磷脂酰乙醇胺.而269-319肽段缺失后,酶蛋白对于这三种磷脂单分子膜的亲和力则表现为无显著差异.以上结果表明269-319肽段在脂肪酶GZEL的界面吸附及对磷脂选择性方面均发挥有重要作用.