磁性壳聚糖微球固定化黄嘌呤氧化酶及其酶学性质的研究

摘要

本文利用化学共沉淀法制备Fe3O4磁性颗粒,并以此为磁核通过乳化交联法制备磁性壳聚糖微球,以环氧氯丙烷对微球表面进行活化,用于黄嘌呤氧化酶的固定化研究.以微球表面的环氧基密度为活化指标,确定了活化过程的最适工艺条件:环氧氯丙烷体积分数为40％,NaBH4浓度为0.60 g/L,NaOH浓度为1.20 mol/L.对微球进行结构表征,结果表明:壳聚糖成功包裹了Fe3O4磁生粒子,且已活化微球的表面具有环氧基活性基团;Fe3O4磁生粒子、未活化和已活化磁性壳聚糖微球的中径分别为2.16、20.30和24.69 μm.活化结束后,将黄嘌呤氧化酶固定在磁性微球上.以酶活为指标,确定最适固定化工艺为:时间1h,温度30℃,pH8.0.对固定化黄嘌呤氧化酶的酶学性质研究,结果表明:酶的最适作用温度为48℃,最适作用pH为8.5,酶具有良好的热稳定性、pH稳定性及操作稳定性.