人分化相关基因Ndr3的克隆、组织表达谱及亚细胞定位研究

摘要

目的:研究人源分化相关新基因Ndr3的克隆、组织表达谱及亚细胞定位.方法:采用电子拼接和PCR扩增技术,从人22周孕龄胎肝cDNA文库中获得与人Ndr1基因同源的一段表达性序列标签,继而从成人脑cDNA文库分离出Ndr3的全长cDNA;采用点杂交分析和多组织Northern杂交分析方法,确定其组织表达谱;将其亚克隆入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1,用脂质体介导法转染COS-7细胞,确定其亚细胞定位.结果与结论:Ndr3的全长cDNA为2879bp,其开放阅读框(ORF)编码375个氨基酸,染色体定位为20q12-11.23.Northern 杂交和点杂交分析显示,NDR3在脑组织和睾丸中高表达,在肾、心肌和前列腺中有一定量的表达,在胚胎组织的表达较低,在8种人肿瘤细胞中的表达极低.与绿色荧光蛋白融合表达的实验结果显示,该蛋白定位于核外胞浆内.