人类核糖体S6激酶RPS6KA5的cDNA克隆及组织表达谱分析

摘要

人类核糖体S6激酶包括两个蛋白家族P90^(RSK)和P70^(S6K),它们分别介导着两条细胞信号传导通路。当这些激酶活性被它们的抗体或纳巴霉素抑制时,细胞的增殖随之停止。但当纳巴霉素的结构类似物—免疫抑制剂FK-506作用于细胞时,虽可抑制成纤维细胞PBL1的增殖,但却不能抑制P90^(RSK)、P70^(S6K)和MAPK的活性。这提示体内还存在着已知P90^(RSK)和P70^(S6K)蛋白的替代者或还存在着不涉及已知P90^(RSK)和P70^(S6K)的信号通路。为此,本文采用“同源筛选”策略,试图证实上述推测。我们以小鼠P90^(RSK)基因的保守性序列为探针,在NCBI EST数据库中进行同源筛选,得到三个人体同源EST片段。以EST片段的整合序列为探针,在人脑组织cDNA文库中进行杂交筛选,最终获得3833bp的全长cDNA序列,其中第165-2570bp为一完整的开放阅读框,编码了802个氨基酸。这个推导蛋白质与人P90^(RSK)家族成员具有较高的氨基酸同源性,并被命名为RPS6KA5,它在国际GenBank的登录号为:AF090421,Northern杂交显示该基因在人各组织中广泛表达,RH定位将该基因定于14号染色体长臂31—32.1的范围内,另一新的P70^(S6K)基因(GenBank注册登记号为AF037447)也已被克隆,从而证实了人体内存在着已知P90^(RSK)及P70^(S6K)家族基因替代者的最初设想。