兽疫链球菌原生质体激光诱变及高产菌株筛选

摘要

探索了透明质酸(Hyaluronic acid)产生菌一兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicas)原生质体制备与再生的最佳条件.研究了酶浓度、酶解时间、高渗液的选择、预处理及高渗预培养等因素的影响.确定了最佳条件为:经1.2%甘氨酸预处理及高渗预培养共同作用2h后,用50U/mL溶菌酶,在NaCl高渗体系中,于39℃作用60min.在此条件下,原生质体形成率可达94.6%,再生率可达18.5%.用不同功率的He-Ne激光照射不同时间诱变原生质体,当功率密度为40mW/cm2,照射时间为300s时,其致死率可达99.88%.从存活变异株中筛选出一株高产透明质酸菌株,其产量(2.21g/L)达原始菌株(0.49g/L)的4.5倍.