RNAi沉默Skp2抑制胃癌细胞SGC7901侵袭作用的实验研究

摘要

目的 研究RNA干扰(RNAi)沉默S期激酶相关蛋白2(Skp2)对胃癌细胞侵袭的影响.方法 以胃癌细胞株SGC7901为实验对象,构建、并筛选出以Skp2基因为靶向的稳定表达载体,导入胃癌细胞,筛选获得稳定转染细胞株.采用侵袭实验检测侵袭能力的变化;明胶酶谱法观察基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9蛋白的活性;Western Blotting检测p27、p21、Sp1和Kazal基序逆向诱导半胱氨酸丰富蛋白(RECK)的表达.结果 侵袭实验显示:与对照组相比,实验组侵袭能力显著下降,侵袭细胞数显著减少(P＜0.05);明胶酶实验显示:实验组中MMP-2、MMP-9活性降低;Western Blotting显示:实验组细胞p21、p27和RECK蛋白表达显著增强,Sp1蛋白表达下调(P＜0.05).结论 通过Skp2-shRNA特异性沉默Skp2基因可下调Sp1,增强RECK表达,降低胃癌细胞在体外的侵袭能力.