HPV18阳性和HPV18阴性子宫颈癌组织中miR-24-3p和HOXB8蛋白的表达差异及其机制研究

摘要

目的:检测HPV18阳性和HPV18阴性子宫颈癌患者癌组织中miR-24-3p和HOXB8的表达差异并探讨其变化机制.方法:选取2015年1月-2019年1月于本院就诊的HPV18阳性子宫颈癌患者40例(HPV18+组)和HPV18阴性子宫颈癌患者40例(HPV18-组)的手术标本.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组miR-24-3p和HOXB8 mRNA的表达水平;免疫印迹法检测两组HOXB8蛋白的表达水平;巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测两组miR-24-3p启动子区DNA甲基化水平;染色质免疫共沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)检测两组miR-24-3p启动子区H3K27me3水平;培养人子宫颈癌细胞系HeLa细胞,分别转染miR-24-3p模拟物和miR-24-3p抑制物后检测HOXB8的表达水平.结果:HPV18-组miR-24-3p的相对表达水平高于HPV18+组(P<0.01).HPV18-组HOXB8 mRNA和蛋白表达水平均低于HPV18+组(P<0.01).miR-24-3p启动子区富含CpG位点和CpG岛,HPV18-组miR-24-3p启动子区DNA甲基化水平低于HPV18+组,(P<0.01).HPV18-组miR-24-3p启动子区H3K27me3水平低于HPV18+组,(P<0.01).在Hela细胞过表达miR-24-3p可抑制HOXB8的表达,而敲减miR-24-3p的表达可提高HOXB8的表达,与阴性对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:HPV18可能通过DNA甲基化和组蛋白甲基化下调miR-24-3p的表达导致HOXB8表达升高,进而促进子宫颈癌的发生发展,为HPV18+子宫颈癌的治疗研究提供了实验基础和干预靶点.