阿仑膦酸钠对人骨髓间充质干细胞体外骨向诱导的研究

摘要

目的：探讨不同浓度阿仑膦酸钠对人骨髓间充质干细胞体外骨向诱导增殖和成骨诱导分化能力的影响。方法：取生长状态良好的第四代细胞，分为实验组（不同浓度的阿仑膦酸钠，A-F组）、空白对照组（L-DMEM，G组）和阳性对照组（地塞米松，H组）各自诱导成骨分化。观察细胞形态，放射免疫法检测各组hBMSCs骨钙素的分泌能力，实时荧光定量PCR检测各组细胞培养液中Runx2和Osx mRNA的表达情况，并检测经成脂肪细胞诱导分化后细胞内脂蛋白脂酶（LPL）mRNA的表达情况。结果：hBMSCs诱导分化至第7天时，A-F组大部分细胞仍呈长梭形，G组部分细胞开始出现形态学改变；各组细胞培养基中骨钙素均随诱导分化时间推移而增多；各组细胞表达Osx和Runx2 mRNA也随诱导分化时间推移而增多；hBMSCs经诱导分化21 d时，A-F组细胞Osx和Runx2 mRNA表达量进一步增加，E组和F组超过半数细胞阳性表达，高于其他阿伦磷酸钠工作液诱导组；在阴性对照组，始终未见有细胞形态学改变、骨钙素表达和Osx和Runx2 mRNA表达。结论：ALN能促进hBMSCs增殖和骨向分化，1×10-6mol/L为其诱导分化的合适浓度。