人骨髓间充质干细胞

摘要： 背景:老年缺血性心脏损伤患者自体干细胞移植治疗效果欠佳,需要探索提高老年干细胞修复再生能力的有效途径。目的:探讨低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对心肌的保护作用,为改善老年患者自体干细胞移植疗效提供实验支持。方法:将青年人骨髓间充质干细胞置于常氧培养箱培养,老年人骨髓间充质干细胞分别置于常氧和低氧培养箱培养,收集条件培养基分为青年常氧培养基组、老年常氧培养基组和老年低氧培养基组。H9C2细胞用3种条件培养基在常氧培养箱中培养24 h后,加入300μmol/L过氧化氢继续培养30 min诱导氧化应激,采用CCK-8法检测细胞活性,活性氧试剂盒检测活性氧水平反映氧化应激损伤程度,Western blot检测Bax、Bcl-2表达量反映细胞凋亡水平,Western blot检测p-AKT表达量反映AKT活化水平。另外,老年低氧培养基处理及过氧化氢诱导细胞氧化应激前,用含50μmol/L LY294002的DMEM培养液培养2 h,以阻断PI3K/AKT通路的激活,然后采用CCK-8法检测细胞活性。结果与结论:①与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞活力显著增加(P<0.01);凋亡相关蛋白Bax表达显著降低(P<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达显著增高(P<0.05);活性氧水平显著降低(P<0.05);②与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞中p-AKT蛋白表达显著增高(P<0.05);③与老年低氧培养基组比较,应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,H9C2细胞活力下降(P<0.05);④结果提示,低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基通过AKT通路减弱H9C2细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,提高细胞活性。

摘要： 背景:哇巴因作为Na+/K+-ATPase的配体可与其结合调节细胞的增殖代谢,研究哇巴因对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响,可为骨缺损、骨病的治疗提供思路.目的:探讨不同浓度Na+/K+-ATPase配体哇巴因对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响.方法:以人工髋关节置换手术中废弃的新鲜骨髓为实验材料,采用全骨髓直接贴壁培养法分离纯化获得人骨髓间充质干细胞,作为诱导成骨分化的实验细胞;成骨诱导前以不同浓度哇巴因(10,100,1000 nmol/L)处理人骨髓间充质干细胞24 h,未经药物处理的人骨髓间充质干细胞直接进行诱导作为对照组,然后成骨诱导21 d后进行茜素红染色,使用Image Pro Plus软件测量染色面积比例,比较各组产生钙化结节量的差异.结果 与结论:与对照组比较,低浓度(10 nmol/L)哇巴因刺激人骨髓间充质干细胞后,茜素红染色钙化结节数量增多,染色面积高于对照组(P<0.05);高浓度(100,1000 nmol/L)哇巴因刺激后钙化结节数量减少,染色面积低于对照组(P<0.05),且浓度越高钙化结节数量越少.结果 表明,人工髋关节置换术中废弃的新鲜骨髓可作为分离纯化得到人骨髓间充质干细胞的实验材料,低浓度哇巴因可促进人骨髓间充质干细胞成骨分化,高浓度哇巴因抑制人骨髓间充质干细胞成骨分化.

摘要： 背景:细胞永生化是细胞获得持续增殖能力的一种特性,大T抗原基因可使细胞永生化效率提升,并广泛应用于实验中,越来越受到研究者的关注.目的:建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株,为人骨髓间充质干细胞的临床应用奠定基础.方法:使用含有猴空泡病毒40大T抗原基因的重组质粒载体转染人骨髓间充质干细胞,连续传代培养,通过形态学、细胞增殖能力、细胞表面标记、多向分化潜能等方法进行鉴定.结果 与结论:①该方法构建的永生化细胞株为贴壁生长的梭形细胞,具有人骨髓间充质干细胞特异性表面标志;②转染后第50代人骨髓间充质干细胞仍然可表达猴空泡病毒40大T抗原基因;③永生化细胞株的增殖能力优于未转染人骨髓间充质干细胞;④永生化细胞株具有向成骨、成脂肪、成软骨细胞分化的潜能;⑤由此可见,转染猴空泡病毒40大T抗原基因不影响人骨髓间充质干细胞的生物学特性和分化能力,该方法可以用于建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株.

摘要： 背景:前期研究发现低强度脉冲式超声波可以促进人骨髓间充质干细胞增殖.目的:探讨FAK/PI3K/Akt信号通路在低强度脉冲式超声波促进人骨髓间充质干细胞增殖中的作用机制.方法:将购买的商品化人骨髓间充质干细胞复苏培养至第4代,分为0 mW/cm2超声波组(对照组)、50 mW/cm2超声波组、50 mW/cm2超声波+PF-562271组,其中50 mW/cm2超声波+PF-562271组在超声处理前加入1μL FAK/PI3K/Akt信号通路抑制剂PF-562271进行预处理.每隔24 h超声刺激1次,每次5 min,刺激3次后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot法检测FAK及其下游靶基因和细胞周期蛋白D1的表达.结果 与结论:①与对照组相比,50 mW/cm2超声波组细胞增殖能力明显增强(P﹤0.05),使用PF-562271抑制FAK/PI3K/Akt信号通路后,细胞增殖能力明显降低(P﹤0.001);②与对照组相比,50 mW/cm2超声波组FAK、p-FAK、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt和细胞周期蛋白D1的表达均上调(P﹤0.05);与50 mW/cm2超声波组相比,50 mW/cm2超声波+PF-562271组上述指标明显降低(P﹤0.05);③与对照组相比,50 mW/cm2超声波组G1期细胞比例减少(P=0.026),S期细胞比例增多(P=0.002);与50 mW/cm2超声波组相比,50 mW/cm2超声波+PF-562271组G1期细胞比例升高(P=0.023),S期细胞比例降低(P=0.035);④结果表明,低强度脉冲式超声波可能通过FAK/PI3K/Akt信号通路上调细胞周期蛋白D1促进人骨髓间充质干细胞的增殖.

摘要： 背景:细胞永生化是细胞获得持续增殖能力的一种特性,大T抗原基因可使细胞永生化效率提升,并广泛应用于实验中,越来越受到研究者的关注。目的:建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株,为人骨髓间充质干细胞的临床应用奠定基础。方法:使用含有猴空泡病毒40大T抗原基因的重组质粒载体转染人骨髓间充质干细胞,连续传代培养,通过形态学、细胞增殖能力、细胞表面标记、多向分化潜能等方法进行鉴定。结果与结论:①该方法构建的永生化细胞株为贴壁生长的梭形细胞,具有人骨髓间充质干细胞特异性表面标志;②转染后第50代人骨髓间充质干细胞仍然可表达猴空泡病毒40大T抗原基因;③永生化细胞株的增殖能力优于未转染人骨髓间充质干细胞;④永生化细胞株具有向成骨、成脂肪、成软骨细胞分化的潜能;⑤由此可见,转染猴空泡病毒40大T抗原基因不影响人骨髓间充质干细胞的生物学特性和分化能力,该方法可以用于建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株。

摘要： 背景:前期研究发现低强度脉冲式超声波可以促进人骨髓间充质干细胞增殖。目的:探讨FAK/PI3K/Akt信号通路在低强度脉冲式超声波促进人骨髓间充质干细胞增殖中的作用机制。方法:将购买的商品化人骨髓间充质干细胞复苏培养至第4代,分为0 mW/cm^(2)超声波组(对照组)、50 mW/cm^(2)超声波组、50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组,其中50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组在超声处理前加入1μL FAK/PI3K/Akt信号通路抑制剂PF-562271进行预处理。每隔24 h超声刺激1次,每次5 min,刺激3次后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot法检测FAK及其下游靶基因和细胞周期蛋白D1的表达。结果与结论:①与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组细胞增殖能力明显增强(P﹤0.05),使用PF-562271抑制FAK/PI3K/Akt信号通路后,细胞增殖能力明显降低(P﹤0.001);②与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组FAK、p-FAK、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt和细胞周期蛋白D1的表达均上调(P﹤0.05);与50 mW/cm^(2)超声波组相比,50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组上述指标明显降低(P﹤0.05);③与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组G1期细胞比例减少(P=0.026),S期细胞比例增多(P=0.002);与50 mW/cm^(2)超声波组相比,50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组G1期细胞比例升高(P=0.023),S期细胞比例降低(P=0.035);④结果表明,低强度脉冲式超声波可能通过FAK/PI3K/Akt信号通路上调细胞周期蛋白D1促进人骨髓间充质干细胞的增殖。

摘要： 背景:老年缺血性心脏损伤患者自体干细胞移植治疗效果欠佳,需要探索提高老年干细胞修复再生能力的有效途径.目的:探讨低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对心肌的保护作用,为改善老年患者自体干细胞移植疗效提供实验支持.方法:将青年人骨髓间充质干细胞置于常氧培养箱培养,老年人骨髓间充质干细胞分别置于常氧和低氧培养箱培养,收集条件培养基分为青年常氧培养基组、老年常氧培养基组和老年低氧培养基组.H9C2细胞用3种条件培养基在常氧培养箱中培养24 h后,加入300 μmol/L 过氧化氢继续培养30 min诱导氧化应激,采用CCK-8法检测细胞活性,活性氧试剂盒检测活性氧水平反映氧化应激损伤程度,Western blot检测Bax、Bcl-2表达量反映细胞凋亡水平,Western blot检测p-AKT表达量反映AKT活化水平.另外,老年低氧培养基处理及过氧化氢诱导细胞氧化应激前,用含50 μmol/L LY294002的DMEM培养液培养2 h,以阻断PI3K/AKT通路的激活,然后采用CCK-8法检测细胞活性.结果与结论:①与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞活力显著增加(P ＜ 0.01);凋亡相关蛋白Bax表达显著降低(P ＜0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达显著增高(P ＜ 0.05);活性氧水平显著降低(P ＜ 0.05);②与老年常氧培养基组比较,老年低氧培养基组H9C2细胞中p-AKT蛋白表达显著增高(P ＜ 0.05);③与老年低氧培养基组比较,应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,H9C2细胞活力下降(P ＜0.05);④结果提示,低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基通过AKT通路减弱H9C2细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,提高细胞活性.

摘要： 目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中非编码小RNA(sncRNAs)表达的调控作用。方法选择2021年8月至2021年10月于上海交通大学医学院附属新华医院骨科接受手术治疗的先天性髋关节发育不良患者5例。通过全骨髓血贴壁法分离hBMSCs。TNF-α组采用含有10 ng/ml TNF-α的完全培养基进行干预,对照组加入等体积的完全培养基。干预24 h后提取hBMSCs总RNA,应用small RNA测序法检测sncRNAs的表达情况,并应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)进行验证。结果经TNF-α干预,hBMSCs中5个miRNA(hsa-novel-170-mature、hsa-miR-155-5p、hsa-miR-1260a、hsa-novel-202-mature、hsa-novel-116-mature)、4个piRNA(DQ592932、DQ570992、DQ593325、DQ582827)的表达上调(P<0.05),4个miRNA(hsa-miR-141-3p、hsa-miR-3065-5p、hsa-novel-155-mature、hsa-miR-27a-5p)、13个snoRNA(SNORD14D、SNORD116-3、SNORA21、SNORD60、SNORD81、SNORD32A、SNORD117、SNORD2、SNORD1C、SNORD36B、SNORD4B、SNORA58、SNORA64)和1个snRNA(NR_003137.2)的表达下调(P<0.05)。结论TNF-α可以调控hBMSCs中多种sncRNAs的表达,进而影响hBMSCs成骨分化过程。

摘要： 目的观察盘龙七片对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的作用并探讨其机制。方法BMSCs细胞分为对照组和盘龙七片处理组。MTT检测细胞增殖并确定盘龙七片最佳浓度。RT-PCR和western blot分别检测Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达。检测骨钙素、碱性磷酸酶(ALP)及Wnt/β-catenin通路蛋白的表达水平。结果盘龙七片促进BMSCs增殖,且随着质量浓度的升高增加更明显(P<0.05)。盘龙七片组细胞中Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达高于对照组(P<0.05),骨钙素水平和ALP活性高于对照组(P<0.05);Wnt3和β-catenin的蛋白表达高于对照组(P<0.05),p-GSK-3β的蛋白表达低于对照组(P<0.05)。结论盘龙七片能够促进BMSCs细胞成骨分化,且其作用可能是通过激活Wnt/β-catenin通路产生的。

摘要： 目的观察水蛭素对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)成骨分化的影响。方法BMSCs细胞分为正常培养的对照组、成骨诱导的诱导组以及加入不同浓度(1、10、20 ATU/mL)处理的水蛭素组。MTT检测细胞增殖并筛选水蛭素最适作用浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡。RT-PCR和Western blot分别检测成骨基因Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达。BCIP/NBT染色法检测细胞中的碱性磷酸酶水平。茜素红染色检测矿化结节。检测VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的mRNA和蛋白表达。结果骨髓间充质干细胞经成骨诱导细胞增殖显著增加,中高浓度的水蛭素可以不同程度促进成骨诱导的BMSCs细胞增殖(P<0.05),并筛选出20 ATU/mL作为水蛭素的使用浓度。水蛭素抑制成骨诱导的BMSCs细胞凋亡,上调Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达,增加碱性磷酸酶水平,促进细胞中矿化结节的生成,并提升BMSCs细胞中VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的表达(P<0.05)。结论水蛭素可能通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化。

摘要： 香兰素是具有抗氧化作用的食品添加剂,本研究以对放射损伤较为敏感的人骨髓间充质干细胞(hBMSC)为对象,研究香兰素衍生物VND3207对60Coγ射线照射诱发正常人组织干细胞基因组DNA损伤的防护效应.选择体外培养传代的P4或P5代龄的hBMSC细胞,通过细胞克隆形成试验,分别进行照射前2h或照射后即刻加VND3207,观察香兰素衍生物VND3207对人骨髓间充质干细胞的保护作用.结果表明在照前和照射后加入VND3207,均能提高BMSC的辐射抗性,照射前加药优于照射后加药.彗星电泳检测DNA双链断裂损伤试验显示,在照射前2h加入不同浓度VND3207保护下,60Coγ照射细胞的DNA拖尾现象明显减轻.γ-H2AX免疫荧光原位杂交的检测试验显示,照射前2h加入5100μmol/LVND3207能显著减少细胞在受照后30 min的γH2AX的簇集点水平,并且有药物浓度依赖性.Western blot检测4Gy60C0γ照射后的γH2AX的表达情况,同样表明VND3207处理的细胞γH2AX水平明显减低,并且减少的程度与药物浓度成依赖关系.VND3207能够有效减轻60Coγ射线照射人骨髓间充质干细胞的损伤,有效提高DNA修复能力,从而发挥对机体造血组织放射防护作用.

摘要： 目的:探讨过表达20S蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)对扩增晚期人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的增殖、分化及抗氧化能力的影响,寻求维持hBMSCs细胞活力的有效手段.方法:(1)构建PSMB5慢病毒载体,转染体外扩增晚期hBMSCs(MOI=60),对照组转染GFP慢病毒载体.(2)荧光定量PCR及Western blotting检测PSMB5的表达水平,化学发光法检测蛋白酶体活性.(3)Brdu掺入实验鉴定细胞增殖能力,CCK-8法检测细胞活力,衰老相关β-gal染色(SA-β-gal染色)计数衰老细胞数,Western blotting检测细胞周期相关蛋白,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)的表达变化.(4)300uM双氧水处理hBMSCs30min,建立氧化应激模型,CCK-8法检测细胞存活率.(5)β-巯基乙醇和全反式维甲酸诱导hBMSCs向神经元分化,免疫荧光染色观察早期神经元标志物Tuj1阳性细胞率;脑内注射诱导分化后的hBMSCs,在体观察hBMSCs向神经元分化的能力.结果:(1)PSMB5慢病毒载体转染晚期hBMSCs后,PSMB5在mRNA水平较对照组上调5.24±0.21(p＜0.01),蛋白水平升高2.56±0.21倍(p＜0.01),蛋白酶体活性增强2.3±0.08倍(p＜0.01),提示过表达PSMB5能够上调晚期hBMSCs蛋白酶体活性.(2)PSMB5组Brdu阳性率较GFP对照组增加10％(p＜0.05),CCK-8结果显示PSMB5组细胞活力是对照组1.1±0.03倍(p＜0.05),SA-β-gal阳性细胞数较GFP对照组减少15％(p＜0.05),提示过表达PSMB5能够增强晚期hBMSCs细胞活力,有助于延缓复制性衰老进程.Western blotting结果显示PSMB5组,细胞周期相关蛋白Cyclin D1和CDK4表达水平分别较对照组升高56％和23％(p＜0.01),提示PSMB5过表达可能有利于推进细胞周期进程从而维持晚期hBMSCs增殖能力.(4)双氧水处理晚期hBMSCs,CCK-8实验显示PSMB5组较对照组细胞存活率增加1倍(p＜0.01),提示过表达PSMB5能够增强hBMSCs的抗氧化能力,提高细胞存活率.(5)经体外诱导分化后,PSMB5组Tuj1阳性率为29±3％,较对照组(22±2％)显著提高(p＜0.01).脑内注射诱导细胞,GFP组Tuj1阳性细胞呈圆形未见明显突起,而PSMB5组个别Tuj1阳性细胞伸出突起并向远端延伸,形态更接近成熟神经元,提示其过表达PSMB5有助于维持晚期hBMSCs分化潜能.结论:20S蛋白酶体亚单位PSMB5在维持hBMSCs增殖和分化潜能中发挥重要作用,过表达PSMB5可能是延缓hBMSCs复制性衰老的有效途径.

摘要： 人骨髓间充质干细胞(hMSCs)是一种多潜能的干细胞，在未分化的状态下具有增殖能力，并具有分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等多种类型细胞的潜能。先前研究表明，模拟失重环境抑制了hMSCs向成骨细胞的分化，促进了向脂肪细胞的分化。但是，失重环境是否也影响了未分化状态的hMSCs还不清楚。rn 本研究利用大梯度强磁场产生的强磁重力环境(0g，1g和2g)，以地面正常重力为对照，研究模拟失重环境对分离的原代hMSCs的影响。在实验的12h取细胞用荧光显微镜观察细胞的形态，核染色质及骨架结构变化，用MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和周期分布变化，同时检测p53蛋白在mRNA和蛋白水平上的表达变化。采用p53信号途径抑制剂检测p53信号途径在模拟失重环境诱导的hMSCs凋亡中的作用。结果表明，模拟失重环境诱导了hMSCs典型的凋亡特征：细胞变圆，膜起泡，染色体凝集和边集化。0g位置的凋亡率达，75％。

摘要： 利用人骨髓间充质干细胞移植治疗新生儿缺氧缺血性脑病是目前医学研究的热点之一。新生儿缺氧缺血性脑病治疗的最好时间窗是发病初的6个小时左右。但在这个时间段，脑局部组织存在兴奋性氨基酸的毒性、钙离子内流、酸中毒和氧自由基的损伤等许多因素构成的不良环境。不良环境造成移植人的干细胞发生凋亡或坏死。因此探讨骨髓间充质干细胞的抗凋亡策略，有利于干细胞移植的成功。rn Par-4(prostate apoptosis response-4)基因是与神经细胞凋亡调控密切相关的一个促凋亡基因。本文研究了小RNA干扰靶向抑制Par-4基因表达对人骨髓间充质干细胞中CD2相关蛋白表达的影响及意义。

摘要： 间充质干细胞是具有自我增殖、免疫调节和多项分化潜能的成体千细胞，而人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)因其比较容易获取而成为组织工程和再生医学理想的种子细胞，在干细胞治疗的临床应用中有广阔的前景．骨髓间充质干细胞的长期保存是重要难题。实验尝试用冻干的方法来保存骨髓间充质干细胞．以海藻糖为保护剂，应用差示扫描量热仪(DSC)测量其玻璃化转变温度，从而为冻干工艺的设计提供了基础，从样品容器等方面对人骨髓间充质干细胞的冻干进行了实验研究，并采用含20％胎牛血清的LG—DMEM培养基对冻干后hMSCs进行复苏，获得了初步的成功。

摘要： 人骨髓间充质干细胞(human Mesenchymal stem cells,hMSCs)在特定的培养条件下能定向诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞以及成纤维细胞等,在组织工程学中具有广阔的应用前景.应用扫描电镜观察hMSCs在Cytodex-3微载体上的生长情况为实验提供依据.采用悬浮细胞常规制样技术得到的样品,镜下显示Cytodex-3微载体和Cytodex-3微载体上负载的hMSCs的数量均极少,且负载在Cytodex-3微载体上的hMSCs的体积和表面形态结构变化较大.为了避免这类问题对实验结果的影响,本文对样品制备技术进行了改进,取得了显著的效果。

摘要： 检测骨髓间充质干细胞经X线照射后多潜能性、增殖率、凋亡率等变化情况;探究不同浓度α2M给药后对于骨髓间充质干细胞电离损伤是否减轻.

摘要： 目的：探究基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1 )对人骨髓间充质干细胞(bonemarrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分化的作用.方法：BMSCs分为空白组(A组);实验组:10, 25, 50 ng/mL SDF-1组(B1,B2,B3组)，25 ng/mLVEGF+25 ng/mL SDF-1组(B4组);对照组:25,50 ng/mL VEGF组(C1,C2组)，在添加相应细胞因子的无血清培养基中诱导12d。免疫组织化学检测诱导后BMSCs的血小板内皮细胞黏附分子、血管性血友病因子表达清况。实时荧光定量PCR检测vWF, CD31、血管细胞黏附分子-1、血管内皮生长因子受体-2、血管内皮钙粘蛋白的表达。结果：B4组KDR,VE,vWF,CD31,VCAM-1表达及CD31,vWF阳性率分别较B1,B2,B3组显著升高；B4组VE,vWF表达较C1组显著升高，且vWF阳性率较C1组也显著升高；B4组KDR,CD31,VCAM-1表达及CD31阳性率较C2组显著升高(P<0.01)，且CD31阳性率较C2组也显著升高(P<0.01)。结论：SDF-1对BMSCs向VEC分化起促进作用，联合使用SDF-1和VEGF可以更好地促进BMSCs向VECs分化。

摘要： 目的：建立人骨髓间充质干细胞体外培养系统,检测1,4-苯醌对hBM-MSCs中copine1,copine3表达的影响。方法：采用密度梯度离心和流式细胞技术分离、鉴定hBM-MSCs;10、25、50 μ mol/L1,4-BQ染毒24小时后，实时定量PCR技术和蛋白免疫印迹检测hBM-MSCs中copine1,copine3 mRNA和蛋白质表达情况。结果：hBM-MSCs稳定表达CD29、CD44,几乎不表达CD34、CD45；实时定量PCR的结果证实，在mRNA水平1，4-BQ染毒剂量在10μmol/L即可引起copine 1蛋白表达降低，25μmol/L可引起copine 3蛋白表达水平降低。蛋白免疫印迹试验结果证实1,4-BQ为25μmol/L和50μmol/L分别引起copine 1和copine3表达降低。结论：1,4-BQ可在转录水平和蛋白质水平抑制hBM-MSCs中Copine1和Copine3的表达，本研究结果有助于进一步阐明苯及其代谢物1,4-BQ的血液毒性机制。

摘要： 本文探讨了骨形态发生蛋白(rhBMP-2)的D,L-乳酸-CO-乙醇酸(PLGA)体外缓释生物支架对人骨髓间充质干细胞(MSCs)的影响。

摘要： 本发明涉及一种改良的间充质干细胞培养基、骨髓间充质干细胞及其培养方法和应用，该改良的间充质干细胞培养基包基础培养基、第一组分和褪黑素，第一组分选自辅酶Q10及米托蒽醌甲磺酸盐中的至少一种，第一组分的工作浓度为1μM～20μM，褪黑素的工作浓度为1μM～20μM，第一组分与褪黑素的摩尔比为1：(0.2～10)。上述改良的间充质干细胞培养基能够提高间充质干细胞中线粒体活性和线粒体数量。

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll-Hypaque溶液上；将Ficoll-Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明属于细胞培养技术领域，特别涉及一种骨髓间充质干细胞培养基及骨髓间充质干细胞培养方法。所述骨髓间充质干细胞培养基包括基础培养基、血清、庆大霉素、两性霉素B、维生素C、碱性成纤维细胞生长因子和地塞米松。所述基础培养基为DEME。所述血清为胎牛血清、人体血清中的任意一种。本发明提供的骨髓间充质干细胞培养基培养能够增强骨髓间充质干细胞的增殖能力和附着效率，同时不影响骨髓间充质干细胞的多功能性，有利于骨髓间充质干细胞的临床研究和应用。

摘要： 本发明涉及一种用于直接分化胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂，根据一方面的培养基组合物和方法，不仅可以在短时间内以高产率制备间充质干细胞，而且由于没有胚状体形状的步骤，因此制备工艺简单，并且可以获得具有均质性的细胞，从而具有可以在比现有方法更短的时间内提供细胞治疗剂的效果。

摘要： 本发明涉及一种改良的间充质干细胞培养基、骨髓间充质干细胞及其培养方法和应用，该改良的间充质干细胞培养基包基础培养基、第一组分和褪黑素，第一组分选自辅酶Q10及米托蒽醌甲磺酸盐中的至少一种，第一组分的工作浓度为1μM～20μM，褪黑素的工作浓度为1μM～20μM，第一组分与褪黑素的摩尔比为1：(0.2～10)。上述改良的间充质干细胞培养基能够提高间充质干细胞中线粒体活性和线粒体数量。

摘要： 本发明的目的在于，提供包含治疗效果好的MSC的细胞制剂。提供一种活化的MSC的制造方法，包括使用具有由纤维构成的三维结构的细胞培养载体在含有哺乳动物胎儿附属物来源的活化剂的培养基中培养MSC的工序。此外，还提供选自由p16

摘要： 本发明涉及评估间充质干细胞(MSC)群体的伤口愈合效力的方法。此外，本发明涉及选择用于在cGMP条件下产生干细胞群体的MSC的方法，选择用于产生用于后续药物施用的干细胞群体的MSC群体的方法。此外，本发明涉及选择用于生成主细胞库的MSC群体的方法，以及鉴定适合作为用于产生用于药物用途的MSC群体的起始材料的组织的方法。所述方法包括测定培养基中由MSC分泌至培养基中的选自血管生成素1(Ang‑1)、转化生长因子β(TGF‑β)、血管内皮生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF)的至少两种蛋白质的水平。

摘要： 本发明的目的在于，提供一种对各种疾病发挥优异的治疗效果的新的间充质干细胞及含有该间充质干细胞的新的药物组合物、以及它们的制备方法。本发明为一种ROR1阳性的间充质干细胞。上述ROR1阳性的间充质干细胞优选为CD29、CD73、CD90、CD105及CD166阳性，优选源自脐带或脂肪。

摘要： 本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll－Hypaque溶液上；将Ficoll－Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。

摘要： 本发明公开提供了一种改良人脐带间充质干细胞培养基和人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，所述培养基包括基础培养基和添加物，所述基础培养基为UltraCulture无血清培养基，添加物各组分及浓度为：1.0%‑5.0%血清替代物，1.0‑10.0mM烟酰胺，0.5‑5nM丙酮酸钠，1%非必需氨基酸，1%谷氨酰胺。本发明还公开了一种人脐带间充质干细胞的分离纯化方法，即采用组织培养法结合混合酶消化法，可快速、高效分离得到数量大，纯度高，状态好的脐带间充质干细胞，既缩短原代培养时间，又简便易操作。利用本发明可提高脐带组织的利用率和间充质干细胞得率，并且细胞纯度高，活性好，可满足临床应用的要求。