人结肠癌细胞中TGF-β1基因-509 C>T单核苷酸多态性对启动转录活性的影响

摘要

目的 探讨在人结肠癌细胞中转化生长因子β1 (TGF-β1)基因上游启动子-509 C>T位点多态性对其转录活性的影响.方法 以特定-509 C>T基因型患者DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增得到1对长度为2.14 kb(-1 328～+812)含有-509 C>T 变异的TGF-β1上游基因片段,并将其与不含启动子的pCAT3-enhancer报告基因载体重组, 构建重组体phTGF 2.14C 和phTGF 2.14T.用脂质体转染法将2种重组体分别转染至人结肠癌细胞(SW480和LoVo细胞)中, 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定转染细胞的报告基因CAT活性.结果 在SW480和LoVo细胞中,转染重组体phTGF 2.14C细胞的CAT活性均明显高于转染重组体phTGF 2.14T细胞的CAT活性(P<0.05).结论 -509位点C等位基因可明显增强TGF-β1基因上游调控序列的转录活性.