细胞因子诱导的杀伤细胞体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药性观察

摘要

目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药(MDR)的可行性.方法:在含细胞因子(人重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激冈子、人重组白细胞介索-1、人重组白细胞介素-4和人重组肿瘤坏死因子-a)的RPMI 1640完全培养液中诱导K562细胞株、K562/ADR耐药细胞株分化成树突状细胞(DC).正常人外周血单个核细胞(PBMC)在上述细胞因子诱导下培养成CIK,与成熟的DC共培养成CIK+K562/ADR.DC.应用流式细胞术检测CIK及CIK+K562/ADR-DC的细胞表型.MTT法测定CIK和K562/ADR-DC对K562/ADR的细胞毒作用,流式细胞仪检测CIK组和CIK+K562/ADR-Dc组细胞中糖蛋白(P-gP)、阿霉素(ADR)的含量,RT-PCR检测mdr-1基因表达.结果:CIK、CIK+K562/ADR-Dc细胞经流式细胞仪检测.均具有自己独特的表型.PBMC诱导培养4 d后,CIK开始增殖,第7-9天细胞数量明显增多.K562/ADR来源的Dc和CIK共培养后.细胞增殖速度明显加快,9 d以后与CIK相比2组细胞的增殖速度呈现明显差异.CIK+K562/ADR-DC细胞对K562/ADR的细胞毒作用在效靶比20:1范围内明显高于CIK细胞(P<0.05).CIK组和CIK+K562/ADR-DC组细胞的P-gP和Mdr-1与对照组相比显著降低(P<0.05),ADR表达明显升高.结论:CIK+K562/ADR-Dc对高表达P-gp的K562/ADR耐药细胞株表现出了特异性细胞毒作用,有效提高了细胞内ADR的含量,下调了P-gp蛋白和mdr-1基因的表达,从而使免疫效应细胞体外逆转MDR的效果得以显现.