鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达

摘要

目的:构建双亚基共表达鼠白细胞介素-12(mIL-12)真核表达质粒,并观察其在体内外的表达.方法:将mIL-12 p35和p40全长编码cDNA构建在pcDNA 3.1载体上,然后把p35表达单元(CMV-p35-BGHPA)插入pcDNA 3.1/p40载体,使两个目的基因均受各自的启动子CMV控制,构建成mIL-12双亚基共表达质粒pCmIL-12,并进行体内外表达.结果:pCmIL-12在体外转染COS-7细胞后,经ELISA证实有mIL-12表达,其表达上清能在体外明显增强小鼠NK细胞活性.小鼠皮内注射pCmIL-12亦能增强小鼠NK细胞活性.结论:所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的mIL-12.