白术多指标成分含量测定方法优化

摘要

[目的]通过对白术含量测定方法优化研究,建立一种简单高效准确的白术多指标成分含量测定方法.[方法]采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(high-performance liquid chromatography-diode array detection,HPLC-DAD)测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ和苍术酮4个指标成分.色谱条件:流动相为0.1％磷酸(A)和乙腈(B),流速1.0mL/min,进样量10μL.采用ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6mm×250mm 5-Micron色谱柱,柱温25℃.梯度洗脱程序:0～8min,60％B;8～16min,60％～75％B;16～20min,75％～100％B;20～30min,100％B.检测波长:白术内酯Ⅰ(λ=276nm),白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮(λ=220nm).比较不同提取方法对白术有效成分的提取效果,同时考察不同有机溶剂、溶剂量、超声时间和超声次数等因素对白术超声提取的影响,最后得到白术供试样品的最佳制备方法.[结果]经HPLC方法学考察、供试品溶液制备方法考察,最终选择以10mL无水乙醇为溶剂,超声离心提取,每次10min,重复3次,作为最佳样品制备方法.白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮分别在0.0015～0.1915mg·mL-1(r2=0.9999)、0.0085～0.1350mg·mL-1(r2=0.9999)、0.0015～0.3565mg·mL-1(r2=0.9998)、0.0145～0.9005mg·mL-1(r2=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.45％、101.03％、100.11％、101.18％,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为2.26％、3.29％、3.69％、2.14％.[结论]通过优化的HPLC-DAD白术多指标成分含量测定方法,可同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮4个指标成分,方法简单、高效、准确、稳定.