BICC1对骨髓基质细胞定向分化的调控作用研究

摘要

目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用.方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2.对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14d时碱性磷酸酶染色检测成骨分化情况,在成脂诱导5d时利用油红0染色检测脂滴形成情况;采用qRT-PCR及Western blot技术检测细胞Bicc1过表达对成骨及成脂相关因子的影响.结果:酶切及测序结果显示Bicc1过表达质粒构建成功,将其转染到ST2细胞后,Bicc1 mRNA表达水平较对照组升高15.23倍(P＜0.05).成骨诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞碱性磷酸酶染色增强,成骨相关因子Osterix、碱性磷酸酶、Osteopontin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨钙素的mRNA和/或蛋白表达水平显著上升(均P＜0.05).成脂诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞中脂滴形成减少,油红OD520较对照组明显降低(P＜0.01),成脂相关因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白(FABP4/aP2)和adipsin的mRNA及蛋白表达水平显著下降(均P＜0.05).结论:BICC1可促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,抑制其向脂肪细胞分化.