MiR-148a-3p通过靶向SRPK2抑制结肠癌细胞转移

摘要

目的:MicroRNA (miRNA/miR)参与结肠癌各种生物学过程.目前,miR-148a-3p在结肠癌中的作用还不完全清楚.本研究旨在探讨miR-148a-3p对结肠癌细胞转移及侵袭能力的影响及机制.方法:实时定量PCR (qRT-PCR)检测结肠癌细胞系中miR-148a-3p及SRPK2 mRNA的表达,Western blot检测SRPK2蛋白的表达.使用miR-148a-3p mimic,miR-148a-3p inhibitor调节HCT-116及SW480细胞中miR-148a-3p的水平.通过划痕及transwell实验检测miR-148a-3p对结肠癌细胞迁移及侵袭能力的影响.生物信息学分析预测miR-148a-3p的靶点,荧光素酶报告实验验证.Western blot及qRT-PCR检测miR-148a-3p对结肠癌细胞上皮-间质转化及SRPK2表达的影响.结果:与正常结直肠粘膜细胞FHC相比,结肠癌细胞系中miR-148a-3p水平降低(P＜0.05).结肠癌细胞中miR-148a-3p过表达可以明显抑制结肠癌细胞转移及侵袭能力(P＜0.05).相反的,敲低miR-148a-3p结肠癌细胞转移及侵袭能力增强(P＜0.05).荧光素酶报告系统结果提示SRPK2是miR-148a-3p的直接作用靶点.过表达miR-148a-3p可以抑制SRPK2在结肠癌中的表达(P＜0.05),但是敲低miR-148a-3p时SRPK2表达明显增高(P＜0.05).结论:MiR-148a-3p可能通过靶向SRPK2抑制结肠癌细胞的转移及侵袭能力.MiR-148a-3p可能成为诊断和治疗结肠癌的靶点之一.