探讨c-Met抑制剂PHA665752联合分子靶向药物贝伐单抗或西妥昔单抗对结肠癌细胞HCT-116增殖的影响

摘要

目的:探讨c-Met抑制剂PHA665752联合分子靶向药物贝伐单抗或西妥昔单抗对结肠癌细胞HCT-116增殖的影响.rn 方法:1)采用焦磷酸测序技术检测HCT-116的KRAS基因状态.2)MTT法检测不同浓度、不同作用时间的PHA665752、Bevacizumab、Cetuximab对HCT-116细胞增殖的影响.MTT法检测PHA665752联合Bevacizumab或Cetuximab对HCT-116增殖的影响.3)采用流式细胞术检测PHA665752联合Cetuximab对HCT-116周期及凋亡的影响。rn 结果:1)焦磷酸测序技术检测:HCT-116的KRAS基因为13密码子突变。2)MTT法结果:PHA665752处理，药物浓度越大，对细胞增殖的抑制越明显(P<0.01)。Bevacizumab处理，即使增大药物浓度至320ag/ml，对细胞增殖仍无抑制(P>0.05)。Cetuximab处理，即使增大药物浓度至80ag/ml，对细胞增殖仍无抑制(P>0.05)。PHA665752联合Bevacizumab对HCT-116增殖的抑制强于对照组及Bevacizumab组(P<0.01)，但与PHA665752组比较无差异(P>0.05)。PHA665752联合Cetuximab对HCT-116增殖的抑制强于对照组、Cetuximab组和PHA665752组(P<0.01).3)流式细胞术结果:a.细胞周期，对照组细胞的G0/G1期百分比为(47.33±0.45)%;Cetuximab组细胞的G0/G1期百分比为(43.83±0.35)，少于对照组(P<0.01);PHA665752组细胞的G0/G1期百分比为(71.90±0.26)，多于对照组(P<0.01);PHA665752联合Cetuximab组细胞的G0/G1期百分比为(60.00±0.70)，多于对照组和Cetuximab组(P<0.0l),但少于PHA665752组(PL0.01)。b.细胞凋亡，对照组细胞凋亡率为(6.04±0.06)%,Cetuximab组细胞凋亡率为(5.99±0.13)，两组无统计学差异(P>0.05);PHA665752组细胞凋亡率为(10.35±0.02)，多于对照组(P<0.01);PHA665752联合Cetuximab组细胞凋亡率(13.55±0.08)，均多于对照组、Cetuximab组和PHA665752组(P<0.01)。rn 结论:1)HCT-116的KRAS基因为13密码子突变。2)HCT-116对PHA665752敏感，对Bevacizumab,Cetuximab均不敏感.3)PHA665752可以增加HCT-116对Cetuximab的敏感性，但不能增加HCT-116对Bevacizumab的敏感性。