茶树冷胁迫诱导抗寒基因CBF的克隆与表达分析

摘要

利用cDNA-AFLP技术进行了茶树低温胁迫处理的基因表达差异分析,获得低温诱导后特异表达的差异片段TDF11(transcript derived fragment, TDF).经BLAST比对发现该片段与白菜、拟南芥、烟草的抗寒基因CBF(C-repeat binding factor)分别有94%、84%、81%的同源性.通过3'/5'RACE的方法获得该片段cDNA全长序列(GenBank,登录号EU857638).所得序列全长981bp,其开放阅读框编码275个氨基酸.该基因与白菜、烟草、拟南芥中的CBF基因编码的氨基酸序列分别有74%、57%、57%的同源性.用RT-PCR的方法对其在低温处理过程中的表达进行分析,结果表明,茶树CBF基因在低温诱导4 h开始表达,在8 h左右表达量最高,然后开始下降,但仍维持在一个较高的水平.结果提示CBF基因可能在茶树抗寒分子机制的形成过程中发挥重要的作用.