HPLC-MS/MS同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度

摘要

目的 建立并应用同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑浓度的液相质谱联用方法(HPLC-MS/MS),研究阿托伐他汀单独给药及与伏立康唑联合给药后,大鼠体内阿托伐他汀的药动学变化以及伏立康唑的浓度变化.方法 采用醋酸钠酸化,甲基叔丁基醚液-液萃取法处理血浆样品,经Thermo Hypersil Gold C18(2.1×100 mm,1.9μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,分析时间6 min;质谱检测采用加热电喷雾离子源(H-ESI)正离子扫描方式,选择反应监测(SRM)模式检测,选用m/z559.2→440.2(阿托伐他汀)、m/z350.2→281(伏立康唑)、m/z370.2→252(内标兰索拉唑)作为定量分析的离子.结果 阿托伐他汀在0.01～100 ng/mL(r=0.9957),伏立康唑在0.025～100 ng/mL(r=0.9966)范围内线性关系良好,阿托伐他汀和伏立康唑的日间和日内精密度均小于13％,提取回收率66.50％～82.67％,血浆样品稳定性符合测定要求.单独给药和联合给药后大鼠血浆中阿托伐他汀的AUC0-24 h分别为(438.78±139.61)和(927.43±204.12))h·μg·L-1,CLz/F分别为(23.89±8.14)和(10.43±2.58)L·h-1·kg-1,Cmax分别为(149.62±131.10)和(159.37±36.83)μg·L-1,t1/2分别为(5.08±1.63)和(5.58±2.11)h,Tmax分别为(0.37±0.14)和(3.60±1.52)h,其中AUC0-24 h和CLz/F,Tmax具有显著性差异(P<0.05).同时可测定合并给药组中伏立康唑的血药浓度.结论 本方法简单快速,灵敏度高,可用于同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度.伏立康唑和阿托伐他汀联用,使阿托伐他汀的部分药代动力学参数发生了改变.