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Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆

     

摘要

目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH)技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了YAC 765E3为非嵌合体,定位于染色体22q11 bcr基因区域,而且可在Ph染色体阳性细胞中易位至9q34。探针特异性杂交效率达95%。结论 FISH技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特殊序列定位的重要检测方法。联合应用Alu-PCR技术特异性扩增载体YAC中人类基因组来源的DNA制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。

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