SIRT1表达可减轻TNF-α诱导的心肌细胞炎症损伤

摘要

目的:研究沉默信息调节因子1(SIRT1)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的心肌细胞炎症损伤中的作用.方法:用20μg·L-1的TNF-α处理大鼠心肌细胞H9c2,分别用real-time PCR和Western blotting方法测定细胞中SIRT1表达水平.用含有SIRT1的慢病毒感染H9 c2细胞,筛选稳定感染的细胞株,给予TNF-α刺激以后,采用real-time PCR和Western blotting方法测定感染效果.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,同时用Western blotting方法检测细胞中p-p65蛋白水平.用核转录因子κB(NF-κB)激活剂PMA处理过表达SIRT1的H9c2细胞,再用上述方法分析NF-κB激活剂对TNF-α环境下SIRT1对H9 c2细胞增殖凋亡的逆转作用.结果:TNF-α处理后细胞中SIRT1表达水平降低,稳定感染SIRT1慢病毒上调TNF-α条件下心肌细胞中SIRT1的表达水平.TNF-α处理后H9 c2细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高.与只经过TNF-α诱导的细胞比较,过表达SIRT1的H9 c2细胞经TNF-α诱导后,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中p-p65蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).NF-κB激活剂PMA可逆转过表达SIRT1对H9 c2细胞增殖活性和凋亡的作用.结论:SIRT1通过抑制NF-κB减少TNF-α诱导的心肌细胞凋亡,提高细胞增殖活性,减少炎症损伤.