PKC和MAPK的激活在TGF-β1诱导人近端肾小管细胞发生细胞肥大中的作用

摘要

目的:研究细胞内蛋白激酶C(PKC)和有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径的激活在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人近端肾小管上皮细胞(HK2细胞)发生细胞肥大中的作用.方法:HK2细胞培养液中预先加入MAPK特异性抑制剂(MEK1)PD 98059或PKC特异性抑制剂STS,然后给予TGF-β1刺激,8h后用MTT法检测细胞增殖、[3H]-亮氨酸掺入试验检测细胞内蛋白水平、流式细胞仪检测细胞周期分布.结果:TGF-β1抑制细胞的增殖、促进细胞内蛋白的合成及促使细胞生长停滞在G0-G1期[(TGF-β1:0.719±0.032vs.对照组:1.199±0.022,P＜0.01);(TGF-β1:286.00±10.15vs.对照组:206.25±19.14,P＜0.01);(TGF-β1:81.633%±3.477%vs.对照组:60.497%±4.813%,P＜0.01)].PD98059和STS均能显著抑制TGF-β1诱导的细胞[3H]-亮氨酸掺入增加(TGF-β1+PD 98059:216.00±13.13,TGF-β1+STS:231.50±10.50vs.TGF-β1:286.00±10.15,P分别小于0.05和0.01).TGF-β1的以上作用均能被STS和PD 98059逆转(TGF-β1+STS:67.610%±3.732%,TGF-β1+PD98059:65.620%±5.625%vs.TGF-β1:81.633%±3.477%,均为P＜0.01;TGF-β1+STS:1.009±0.022;TGF-β1+PD 98059:0.947±0.022 vs.TGF-β1:0.719±0.032,均为P＜0.01).结论:PKC和MAPK的激活可能参与了TGF-β1诱导HK2细胞肥大的发生.