米曲霉giF-1O内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达

摘要

[目的]克隆米曲霉giF-10内切葡聚糖酶基因并检测其在大肠杆菌中的表达.[方法]以自行分离筛选出的天然米曲霉giF-10的基因组DNA为模板,PCR高保真扩增,扩增产物连接到pMD19-T克隆载体上,并构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3).[结果]序列分析表明,其长度为1251bp,编码417个氨基酸,序列比对发现与内切葡聚糖酶基因CelB序列相似性高达100％,将此基因注册GenBank(HQ739052).刚果红水解圈筛选结果表明已成功表达.[结论]克隆了米曲霉giF-10内切葡聚糖酶基因,并在大肠杆菌成功表达,为纤维素酶工业化生产奠定基础.