RNA干扰沉默STC-1基因对结肠癌细胞株HCT116增殖的影响

摘要

目的 探讨RNA干扰技术沉默STC-1基因对结肠癌细胞株HCT116增殖的影响. 方法 将STC-1基因的si-RNA稳定转染至HCT116细胞;采用RT-PCR、Western blot鉴定干扰效果;以STC-1基因沉默细胞HCT116为实验组,以转染空质粒的HCT116细胞和空白的HCT116细胞为阴性对照和空白对照组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)法、细胞倍增时间、平板克隆形成实验、流式细胞术等分析沉默STC-1基因后,HCT116细胞生长速度、细胞周期、克隆形成能力等的改变. 结果 MTT实验结果表明,沉默STC-1基因后,实验组细胞的生长速度明显下降;其细胞周期也发生改变G1期细胞增多、S期细胞减少.空白对照组、阴性对照组和实验组细胞平均倍增时间为分别为(3.718±0.82)h,(3.981±0.918)h,(5.018±0.981)h;空白对照组,阴性对照组和实验组平均细胞克隆形成数目分别为65.68±4.826,71.28±4.662,45.95±4.432.实验组与对照组相比较,平均倍增时间和平均细胞克隆形成数目差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 沉默STC-1基因对结肠癌细胞HCT116的增殖具有重要的作用,这为进一步阐明结直肠癌发病机制奠定了坚实的基础.