肾癌细胞PD-L1表达及与肿瘤微环境中T淋巴细胞功能间相互调控关系的研究

摘要

目的探讨肾癌中程序性死亡配体1(PD-L1)的表达及与肿瘤微环境中T淋巴细胞功能之间的相互调控作用。方法 通过分离人外周血单个核细胞,刺激培养单个CD3+T淋巴细胞;检测786-O、OSRC细胞系PD-L1基因及蛋白表达水平的差异性;ELISA检测外周血T淋巴细胞与786-O、OSRC共培养后γ-干扰素(IFN-γ)的产生水平;通过小干扰RNA下调PD-L1相对高表达的肾癌细胞系与T淋巴细胞共培养后,检测IFN-γ水平的变化;检测786-O、OSRC与T淋巴细胞共培养后PD-L1表达的变化,以及不同浓度IFN-γ对786-O、OSRC中PD-L1表达的影响,分析肾癌细胞系786-O及OSRC中PD-L1的表达与IFN-γ之间的相互调控作用。结果 PD-L1在786-O中的表达水平明显高于OSRC;与单独培养T淋巴细胞相比,与786-O共培养时T淋巴细胞IFN-γ的产生量无明显差异,但与OSRC共培养时T淋巴细胞IFN-γ的产生量明显升高;瞬时干扰降低786-O中PD-L1的表达水平后,与T淋巴细胞共培养,发现T淋巴细胞IFN-γ的产生量较正常共培养组明显升高;共培养体系中T淋巴细胞被激活后两种肿瘤细胞PD-L1的表达明显增高,IFN-γ刺激实验得到相同的结果,且呈剂量依赖性。结论PD-L1高表达的肾癌细胞系可有效抑制外周血T淋巴细胞分泌IFN-γ,导致肿瘤细胞发生免疫逃逸,同时T淋巴细胞分泌的IFN-γ也可以上调肾癌细胞PD-L1的表达,肿瘤微环境中两者存在相互调节作用。