碳酸酐酶-9升高诱导卵巢癌细胞化疗耐药的体外实验研究

摘要

目的:探讨碳酸酐酶-9(CA-9)与卵巢癌细胞对化疗药物卡铂及紫杉醇耐药间的关系.方法:通过转染表达CA-9的pCDNA3flu质粒,构建高表达CA-9的SKOV3细胞,并应用半定量RT-PCR法及Westem blot法验证转染效果.实验分为转染pCDNA3flu/CA-9组和pCDNA3flu组,采用MTT比色法检测pCDNA3flu/CA-9组及pCDNA3flu组SKOV3细胞在卡铂及紫杉醇作用下的存活率并计算两种药物的半数抑制浓度(IC50).结果:半定量RT-PCR法及Westem blot法分别从基因及蛋白表达水平显示pCDNA3flu/CA-9组与pCDNA3flu组及未转染组相比较,CA-9的相对表达量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);而pCDNA3flu组与未转染组之间差异无统计学意义(P＞0.05).在卡铂及紫杉醇作用下,pCDNA3flu/CA-9组的IC50比pCDNA3flu组的IC50升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).不同浓度梯度的卡铂及紫杉醇分别作用于pCDNA3flu/CA-9组及pCD-NA3flu组的SKOV3细胞,pCDNA3flu/CA-9组细胞存活率均明显高于pCDNA3flu组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:在卵巢癌细胞中,高表达CA-9可降低卵巢癌细胞SKOV3对卡铂及紫杉醇的敏感性.