Survivin反义核酸诱导卵巢癌细胞凋亡及逆转多西他赛耐药机制的实验研究

摘要

目的构建Survivin反义真核表达载体(anti-pcD-NA3-svv),探讨其对卵巢癌的凋亡诱导作用、对多西他赛的化疗增敏作用及逆转耐药的机制.方法采用Survivin反义核酸瞬时电转染法转染卵巢癌细胞系Skov3,筛选出阳性细胞株.以Westernblot检测Survivin蛋白的表达,用流式细胞仪检测其对Skov3的凋亡诱导作用,采用MTT法检测其对多西他赛的化疗增敏作用,并检测实验组细胞(Skov3-SVVanti)MDR-1mRNA的表达.结果稳定表达anti-pcDNA3-svv的Skov3-SV-Vanti其Survivin蛋白表达比未转染者明显降低,Skov3-SV-Vanti组细胞流式细胞仪检测显示其凋亡率为19%,对多西他赛的IC50值为(13.3±2.25)ng/mL,而对照组(Skov3)为(53.2±2.45)ng/mL,差异具有明显的统计学意义(P<0.01).Skov3-SVVanti组MDR-1mRNA表达较Skov3组明显减少(P<0.01).结论Survivin反义核酸可诱导卵巢癌细胞凋亡,并通过降低MDR-1mRNA表达增强多西他赛化疗敏感性.