致病性鳗弧菌W-1外膜蛋白ompU基因克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要

从致病性鳗弧菌W-1基因组DNA扩增并克隆了1156bp的特异性片段，含有完整的外膜蛋白ompU基因阅读框，由993个核苷酸组成，编码330个氨基酸残基的蛋白质。与国外已发表的鳗弧菌外膜蛋白基因的序列同源性为100％，与创伤弧菌（Vibrio vulnificus）、霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、费氏弧菌（Vibrio fischeri）和副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的序列同源性分别为72％，69％，68％和64％。将该外膜蛋白基因克隆于pBV220表达质粒，在大肠杆菌中得到了表达，SDS-PAGE分析表明表达蛋白分子量约38kDa，Western blot分析发现表达蛋白能与鳗弧菌外膜蛋白抗体很好的反应。