GRO-α的原核表达及对细胞增殖作用的初步研究

摘要

目的:构建含有GRO-α(生长调节癌基因-1)的重组表达载体,优化重组蛋白在E.coli BL21(DE3)中表达,分析其对肿瘤细胞的增殖作用的影响.方法:RT-PCR扩增GRO-α基因片段,克隆于原核表达载体pGEX4T-1,IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot检测目的蛋白表达.经亲和层析柱纯化目的蛋白,作用于人乳腺癌细胞系MCF-7,应用CCK8检测其对细胞增殖的影响.结果:成功构建pGEX-4T-1/GRO-α原核表达质粒,高效表达GRO-α-GST融合蛋白,大小为34 ku.细胞增殖实验结果显示,该蛋白对人乳腺癌细胞MCF-7增殖具有促进作用.结论:重组GRO-α-GST融合蛋白具有生物学活性,可促进人乳腺癌细胞的增殖,为今后制备相应抗体奠定基础并为乳腺癌的靶向治疗提供新的方法.