玉米赤霉烯酮降解酶基因mbZHD的原核表达及其降解毒素初步研究

摘要

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是由镰刀菌属产生的次生代谢物,是极易污染粮食作物的真菌毒素之一.ZEN具有强烈的雌激素样效应及致癌性,给人类和动物的健康造成巨大威胁.本研究在NCBI数据库中进行同源比对,获得了一些ZHD101降解酶的同源基因,其中,1个来源于真菌——杨盘二孢菌(Marssonina brunnea)的蛋白序列与ZHD101具有32%的同源性,基因大小为861 bp.通过化学合成方法得到该全长基因,通过构建E.coli原核表达系统进行蛋白表达,蛋白经亲和色谱纯化后对ZEN分子进行降解活性验证,HPLC结果表明,该蛋白在6h内对10μg ZEN分子的降解率为98%,酶活为200 U/mL,从而获得了1个新的ZEN降解酶基因.