HDAC6对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响及其机制

摘要

cqvip:目的:明确HDAC6对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响及其机制。方法:应用Westernblot技术检测正常肝细胞系LO2和肝癌细胞系HepG2细胞中HDAC6的表达。应用HDAC6抑制剂TubastatinA抑制HepG2细胞中HDAC6的表达,运用Westernblot及荧光定量PCR技术检测HepG2细胞中转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)和上皮间充质转化(epithelialmesenchymaltransition,EMT)相关分子标志物(N-cadherin,β-catenin,Vimentin)的表达;用TGF-β1抑制剂SB431542刺激HepG2细胞后,检测HepG2细胞中EMT标志蛋白的表达,应用TGF-β1刺激HepG2细胞后观察HepG2细胞的形态变化。应用过表达HDAC6的质粒P3-HDAC6、P3-HDAC6+TGF-β1分别作用于HepG2细胞,通过Westernblot检测HepG2细胞中EMT相关分子标志物的表达,应用划痕及Transwell技术检测HepG2细胞处理前后的迁移和侵袭能力变化。结果:肝癌细胞系HepG2细胞内HDAC6的蛋白表达量明显低于正常肝细胞系LO2(P<0.05)。HepG2细胞TubastatinA组中N-cadherin、β-catenin、Vimentin、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平相较于空白对照组明显增高(P均<0.05)。SB431542组中EMT标志蛋白表达水平相较于空白对照组明显降低(P均<0.01)。TGF-β1刺激HepG2细胞后细胞变得分散且狭长。同时发现P3-HDAC6+TGF-β1组的细胞迁移和侵袭能力在48h后明显强于P3-HDAC6组且弱于空白对照组(P均<0.05)。结论:HDAC6可通过下调TGF-β1的表达从而抑制HepG2细胞的EMT进而抑制HepG2细胞的迁移和侵袭。