PCR-RFLP分析HBV核心启动子基因突变的临床意义

摘要

目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测HBV核心启动子(BCP)基因突变的方法,并探讨其临床意义.方法PCR扩增HBV BCP区(nt1642-nt2027)基因片段,经限制性内切酶Mbo Ⅰ酶切,琼脂糖凝胶电泳分析BCP(nt1762/nt1764)基因突变情况,同时应用定量PCR测定了HBV DNA含量.结果149例临床样本的检测结果显示:BCP基因突变在HBeAb(+)慢性乙型肝炎患者(CHB)和HBV无症状携带者(ASC)中的检出率显著高于相应的HBeAg(+)组患者(P＜0.01);在HBeAb(+)和HBeAg(+)重症乙型肝炎(Severe hepatitis B,SHB)组中差异无显著性(P＞0.05);BCP变异患者血清中HBV-DNA含量比相同模式的野毒株感染高(P＜0.05).结论PCR-RFLP检测HBV BCP基因突变方法简单方便,结果与测序分析一致,具有较好的特异性,适合临床应用;BCP区基因突变可能是HBeAb(+)患者HBV感染的重要原因之一;BCP变异可能与乙型肝炎重症化有一定关系.