HBV前C/C基因与绿色荧光蛋白基因融合表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

摘要

目的:构建含HBV前C/C基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体,并在真核细胞中表达.方法:用PCR法扩增含1.3倍HBV ayw型全基因组真核表达载体pHBV1.3的前C/C基因片断,应用含绿色荧光蛋白基因的真核表达质粒构建融合表达载体,采用脂质体介导方法将其转染到HEK293细胞,并用荧光显微镜及ELISA法检测融合蛋白的表达.结果:经PCR及酶切鉴定,证实成功构建了含HBV前C/C基因的真核表达重组体pEGFP-HBVC,显微镜下观察及ELISA法证实在HEK293细胞中表达了相应融合蛋白.结论:构建的重组表达载体能在真核细胞中表达目的蛋白与GFP的双功能融合蛋白,适合于针对HBV前C/C区的相关研究.