针对HBV-S基因的发夹状siRNAs的表达载体的构建及其在体外培养细胞中对HBV基因表达的抑制作用观察

摘要

目的:探讨通过载体在体外培养的细胞中表达发夹状siRNAs对HBV基因表达的抑制作用.方法构建表达针对HBV S基因的mRNA的发夹状siRNAs的质粒pSilencer2.1-U6-S,并与ayw亚型HBV全基因组表达质粒-pCMV-HBV30共转染体外培养的HepG2细胞,用半定量RT-PCR分析目标mRNA的表达丰度的变化、用ELISA法观察HBsAg表达的变化.各组指标用t检验方法进行显著性检验.结果:siRNA处理组细胞上清中HBsAg、HBeAg含量分别比空白对照组降低63.4％和68.02％,差异有显著性[P<0.01],细胞中的2.1kb的信使RNA含量比空白对照组降低75.2％,差异有显著性[P<0.01=.结论:siRNA能有效的抑制转染ayw亚型HBV全基因组表达质粒-pCMV-HBV30体外培养的HepG2细胞中HBsAg、HBeAg蛋白的表达,与对照组相比,细胞中2.1kb信使RNA的含量明显降低,有效的抑制了HBV在体外培养的HepG2细胞中的复制.

目录

缩写词表

前言

实验材料和仪器

主要实验方法

统计学方法

实验结果

讨论

附图

参考文献

综述RNA干预(RNA interference,RNAi)技术：抗病毒基因治疗的新武器

（一）RNA干预机制

（二）RNA干预在抗病毒基因治疗领域的应用

参考文献

致谢