NK细胞与CIK细胞体外诱导扩增及其活性比较

摘要

目的:探讨体外诱导和扩增NK细胞和CIK细胞的方法,比较二者的增殖能力及其对肿瘤细胞的杀伤活性.方法:提取肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMCs),在细胞因子诱导下培养NK细胞和CIK细胞.观察2种细胞的形态学变化,采用流式细胞术检测CD3 CD56+ NK细胞和CD3+ CD56+ CIK细胞比例,计算细胞扩增倍数；采用ELISA法检测NK细胞和CIK细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)的水平；采用CCK-8法检测NK和CIK细胞对K562细胞株的杀伤活性.结果:经过14 d体外诱导培养后,NK细胞扩增(160.00±12.15)倍,CIK细胞扩增(110.00±15.48)倍,NK细胞的扩增能力强于CIK细胞(P＜0.05)；NK和CIK细胞分泌IFN-γ量分别为(4 227.75±731.94)和(525.96±304.84) μg·L-1,NK细胞分泌IFN-γ的能力强于CIK细胞(P＜0.01)；诱导扩增后NK和CIK细胞对K562细胞株具有较强的杀伤活性,随着效靶比的升高杀伤活性增强.在效靶比为25∶1时,NK细胞和CIK细胞对K562细胞的杀伤率分别为65.35％和57.68％,NK细胞的杀伤活性强于CIK细胞(P＜0.01).结论:在体外成功建立了NK细胞和CIK细胞的诱导扩增体系,NK细胞的扩增能力、IFN-γ分泌水平以及其对K562细胞株的杀伤作用均强于CIK细胞.