猪肌生成抑制素C-端功能区蛋白的分离纯化

摘要

为研究猪肌生成抑制素(myostatin,MSTN)蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,将原核表达菌种MSTN-PGEX-4T-1-BL21进行融合表达,用亲和层析的方法对GST-MSTN和MSTN C-端成熟蛋白进行分离纯化.12%SDS-PAGE结果表明,纯化后的GST-MSTN在38 kD得到清晰目的带,薄层扫描分析显示,目的蛋白质纯度达86.1%.每升菌液提取约4.5 mg融合蛋白.15%SDS-PAGE结果表明,MSTN C-端成熟蛋白功能区在12 kD有明显条带出现.每升菌液提出约1.3 mg MSNT C-端成熟蛋白,占融合蛋白表达量的29%.