人早孕蜕膜基质细胞对育龄期女性外周血Treg的影响

摘要

目的:探讨人早孕蜕膜基质细胞(DSCs)对育龄女性外周血Treg细胞的影响.方法:分离培养育龄期女性外周血淋巴细胞(PBLC);分离培养正常人早孕DSCs并传至第3代或第4代,后分为4组.①对照组:单纯培养PBLC;②共培养组:PBLC+DSCs培养组;③脂多糖(LPS)刺激组:PBLC+DSCs+LPS培养组;④吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)阻断组:PBLC+DSCs+LPS+PDTC培养组.蛋白质印迹法(Western blotting)检测核因子κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测FoxP3 mRNA表达水平;流式细胞仪检测Treg细胞亚群比例.结果:分离培养的人原代DSCs的纯度大于95％.Western blotting和RT-PCR结果显示,共培养组IκBα蛋白、FoxP3 mRNA表达明显高于其余3组(P＜0.05);与共培养组相比,LPS刺激组IκBα蛋白、FoxP3 mRNA表达降低(P＜0.05),与LPS刺激组相比,PDTC阻断组IκBeα蛋白、FoxP3 mRNA表达升高,但仍低于共培养组(P＜0.05).流式细胞术检测显示,共培养组Treg细胞亚群比例高于其余3组(P＜0.05);与共培养组相比,LPS刺激组Treg细胞亚群比例下降;PDTC阻断组Treg细胞亚群比例高于LPS刺激组,但仍低于共培养组(P＜0.05).结论:人早孕DSCs能上调育龄期女性外周血淋巴细胞中Treg细胞亚群比例,加入LPS刺激后Treg细胞亚群比例下降,可能与级联活化IκB激酶,降解IκBα,活化NF-κB信号通路,从而抑制FoxP3表达增高有关.