脂氧素A4改善肺微血管内皮细胞炎症损伤的体外实验研究

摘要

目的 观察脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endo-thelial cells,PMVECs)炎症损伤的治疗作用.方法 体外培养人PMVECs,第一阶段:分为空白对照组(完全培养基培养)和TNF-α组(分别以5、10、20 ng/mL共培养24 h),采用MTT法检测各组PMVECs存活率,用针头式滤器检测TNF-α损伤前后PMVECs的单层通透性.第二阶段:分为TNF-α组(20 ng/mL处理24 h)和LXA4干预组(1、10、100μg/L处理24 h),检测PMVECs存活率和单层通透性,RT-PCR检测PMVECs IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达.结果 (1)5、10、20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率分别是(76.39±9.3)％、(61.87±11.7)％、(49.54±12.6)％,与空白对照组比较,均显著降低(P<0.05),而经1、10、100μg/L三种浓度LXA4干预后,20 ng/mL TNF-α组的PMVECs存活率均得到提高,其中100μg/L LXA4干预后的PMVECs存活率为(82.32±8.7)％,有统计学差异(P<0.01);(2)与损伤前[(0.021±0.011)mL/min·cm2·kPa]比较,TNF-α处理60、90 min后PMVECs单层通透系数(Kf值)显著增高[(0.067±0.007)和(0.096±0.007)mL/min·cm2·kPa,P<0.05)],而LXA4干预60、90 min时Kf值则显著降低[(0.039±0.008)和(0.058±0.011)mL/min·cm2·kPa,P<0.05)];(3)与对照组比较,TNF-α组的IL-1β、VCAM-1、NF-κB p65 mRNA的表达水平均有显著升高(P<0.01或P<0.05),而LXA4干预组显著改善(P<0.01或P<0.05).结论 TNF-α能引起PMVECs的急性炎症损伤,LXA4对TNF-α引起的PMVECs急性炎症损伤有改善作用.