猪整合素β1蛋白的表达及多克隆抗体的制备

摘要

为了制备出猪整合素β1多克隆抗体,根据其氨基酸序列进行生物信息学分析,选取猪整合素β1胞外域具有良好抗原性的位置,根据大肠杆菌偏嗜密码子优化并合成猪整合素β1的重组质粒.接着,使用大肠杆菌原核表达系统进行表达,将纯化的重组蛋白免疫实验兔.通过间接ELISA法检测制备多克隆抗体效价,蛋白免疫印迹的方法对抗体的反应性进行鉴定.实验结果显示,成功表达猪整合素β1蛋白,其蛋白分子质量为102 ku.以纯化后浓度为1 mg·mL-1的重组蛋白免疫,猪整合素β1多克隆抗体效价为1:12800,能够识别天然整合素β1.研究制备了具有良好免疫原性的猪整合素β1多克隆抗体,为后续猪整合素β1作为猪病病毒感染相关蛋白的研究奠定了基础.