绵羊IL-6启动子的克隆及pIL6-TLR4载体构建

摘要

为生产抗病转基因绵羊,并确保转基因羊的安全性.克隆绵羊IL-6启动子序列,以IL-6为启动子构建TLR4过表达载体,转染绵羊成纤维细胞验证功能.用1μg·L-1的LPS刺激转染后的绵羊成纤维细胞,利用qPCR技术和ELISA方法检测受LPS刺激后的成纤维细胞TLR4 mRNA表达量和TLR4蛋白表达量.结果表明,转染后的TLR4 mRNA表达量在2、4、24、48 h显著高于对照组(P<0.05),其中2、4、24 h极显著高于对照组(P<0.01),TLR4蛋白表达量始终高于对照组.说明pIL6-TLR4过表达载体构建成功.