黏着斑激酶siRNA抑制结肠癌细胞株侵袭的机制研究

摘要

目的 研究胃泌素-胆囊收缩素2受体(CCK2R)-黏着斑激酶(FAK)信号通路在人结肠癌细胞侵袭过程中的作用,探讨通过FAK siRNA降低FAK表达抑制癌细胞侵袭的可行性. 方法 使用CCK2R的真核表达载体pCR3.1/CCK2R,转染人结肠癌细胞株Colo320, 使用RT-PCR检测细胞CCK2R表达情况.设计并合成针对FAK的siRNA,转染细胞,抑制FAK表达;使用胃泌素刺激结肠癌细胞,免疫沉淀和蛋白质印迹法检测不同情况下FAK第397位酪氨酸(tyr-397)磷酸化表达情况;Boyden小室法检测相应细胞侵袭力变化. 结果 真核表达载体pCR3.1/CCK2R可以有效增加CCK2R表达,增加CCK2R可以增强胃泌素促FAK tyr-397 磷酸化和细胞侵袭力作用.使用RNA干扰技术可以明显降低细胞内FAK tyr-397 磷酸化,并抑制胃泌素促结肠癌细胞侵袭作用. 结论 胃泌素-CCK2R-FAK信号通路在结肠癌细胞侵袭和转移过程中发挥关键作用,阻断FAK表达可以有效抑制胃泌素促结肠癌细胞侵袭作用.