重组毕赤酵母生产凝乳酶发酵优化

摘要

为了获得毕赤酵母生产凝乳酶的最佳发酵条件,分别从起始诱导OD600、甲醇诱导浓度以及pH等方面研究了P.pastoris GS115在3.6 L发酵罐中表达微小根毛霉来源凝乳酶的高密度发酵,以恒溶氧反馈调节补加甘油和甲醇检测流加控制器在线监测流加甲醇.结果表明,在重组P.pastoris GS115/pPIC9k-chy起始诱导,OD600和甲醇诱导体积分数分别为150和2.0％,诱导pH为5.0时,发酵96 h凝乳酶活达到最大,为l 870 SU/mL,此时对应的生产强度和产物得率均达到最高水平,分别为19.48 SU/(mL·h)和2.42 SU/mL,总蛋白质质量浓度为0.64 mg/mL,凝乳活性与蛋白质水解活性的比值(MCA/PA)为63.43.