海蜇低分子肽制备及体外抗氧化活性

摘要

目的优化海蜇低分子肽(low molecular weight peptide from Rhopilema esculentum Kishinouye,RKLP)制备工艺,评价其抗氧化活性及分析氨基酸组成。方法海蜇利用碱性和中性蛋白酶双酶分步酶解制备海蜇肽,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为指标,响应面实验优化酶解工艺条件。采用超滤技术,获得分子量≤3.5 kDa RKLP。通过测定DPPH自由基、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS]自由基及超氧阴离子(O2-)自由基的清除率,评价RKLP抗氧化活性。氨基酸分析仪分析RKLP氨基酸组成。结果酶解制备海蜇抗氧化肽的最佳工艺条件为:酶解温度50℃、3%碱性蛋白酶pH 7.5酶解2 h、1%中性蛋白酶pH 7.0酶解2 h,所得的DPPH自由基清除率为71.52%±0.59%,接近与预测值70.57%。RKLP水解度为62.10%±0.57%,具有较强的DPPH自由基、ABTS自由基及O2-自由基的清除能力,表明RKLP具有较好的抗氧化活性。RKLP氨基酸种类丰富,必需氨基酸含量达29.87%,蛋白质营养价值较高,且含有较多的与抗氧化活性密切相关的疏水氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸和芳香族氨基酸。结论优化海蜇酶解工艺条件,超滤制备的RKLP具有较强的抗氧化活性及较高的水解度,初步阐释其抗氧化活性机制,为海蜇高值化应用提供一定的理论依据。