B7-PE40新型重组融合外毒素的分子生物学特性预测

摘要

为探讨构建的重组外毒素融合蛋白B7-1-Linker-PE40和B7-2-Linker-PE40及其接头设计的合理性,应用核酸和蛋白质序列分析软件系统GOLDKEY,对上述重组外毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位和二级结构等分子生物学特性进行了计算机模拟预测.结果发现它们分别保留了B7-1,B7-2和PE40的表位特征,没有出现新的表位,其柔性接头处的抗原性也极低.与B7-1,B7-2和PE40的一、二级结构比较发现,这两种融合蛋白各有数个氨基酸残基改变,有的氨基酸改变可轻微影响融合蛋白的二级结构.原核表达的两个融合蛋白经Western印迹分析显示,它们能分别与B7-1,B7-2和PE40单克隆抗体发生特异性结合,表明它们较好地保留了B7和PE40的抗原性和空间结构,与预测的结果一致.提示预测结果会有助于我们研究该系列融合蛋白的体内、外生物学效应,以及设计构建新的其他融合蛋白.